丹萸颗粒抗氧化剂损害作用
丹萸颗粒抗氧化剂损害作用
袁春苏,MD, PhD
2002 年 7 月
替代医疗中心
芝加哥大学
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试验目的
丹萸颗粒为中国恩威药业公司产品。本研究意在评估抗氧化剂的抗氧化应激作用。双氧水在局部缺血 及再灌注过程中起着关键的作用。对氧化剂应激的保护是以蛋白激酶C,线粒体KATP通路或氧化氮途径等局部缺血为前提而诱发的。我们试验以期发现丹萸颗粒 是否具有保护由鸡心肌细胞的抗霉素A所诱发的氧化剂应激的作用,及细胞保护作用是否受蛋白激酶C的催化,线粒体KATP 通路的开启,氧化氮途径的产生及氧化剂的清除的调节。
试验方法
将培养的心肌细胞用丹萸颗粒液 (0.1mg/ml, 0.3mg/ml, 或1mg/ml)预处理两小时后,暴露于双氧水(0.5mM)或抗霉素A(100μM)中两小时。在双氧水中暴露前,细胞单独用丹萸颗粒液(1mg /ml)或用蛋白激酶C抑制剂(胆固醇酯, 2μM),线粒体KATP通路阻滞剂(5-羟癸酸盐,500μM)和氧化氮合酶抑制剂(硝基左旋精氨酸甲酯,L-NAME, 200μM)预处理两小时。氧化剂应激是以细胞内探针2',7'-DCFH/DA的氧化作用来衡量的。细胞的生存力通过PI的摄入量来评估,而其收缩功能 则是由录像机显微镜来观察控制的。另外,丹萸颗粒自由基清除能力测试做体外试验。
试验结果
双氧水 (0.5mM)和抗霉素A(100μM)可使DCF荧光增强和细胞消亡显著增高。丹萸颗粒预处理使DCF荧光减弱并显著改善细胞生存力和收缩功能,且此功 能与剂量相关。但蛋白激酶C抑制剂,线粒体KATP通路阻滞剂或氧化氮合酶抑制剂(胆固醇酯,5-羟癸酸盐或硝基左旋精氨酸甲酯)不能调节丹萸颗粒的保护 功能。
丹萸颗粒对双氧水离子及抗霉素A导致的心肌细胞内源性外源性的氧化剂应激和细胞消亡有显著保护作用,且其心脏保护作用不需要PKC活力,线 粒体KATP通路的开启或氧化氮的产生。丹萸颗粒极有可能是通过直接清除活性氧簇而发挥作用的。我们的观察表明丹萸颗粒能有效清除双氧水原子团或羟基原子 团。
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